تشخیص و افتراق سریع فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از روش loop-mediated isothermal amplification
نویسندگان
چکیده
سابقه و هدف: فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا فلوک های کبدی شایعی بوده که روی انسان ها و دام ها در تمام نقاط جهان اثرگذار هستند. در مطالعه حاضر ما تکنیک سریع loop-mediated isothermal amplification (lamp) را در تشخیص و افتراق گونه های فاسیولا ارزیابی نمودیم. مواد و روش ها: تعداد 50 کرم فاسیولا از کبد گاو و گوسفند کشتارگاه های استان مازندران جداسازی شدند. تعداد 8 پرایمر جهت تکثیر ناحیه ژنی 28s ribosomal rna برای واکنش lamp برای گونه های فاسیولا طراحی گردید. واکنش lamp در حجم µi 20 تحت شرایط تک دمایی در0c 60 به مدت 90 دقیقه انجام گرفت. نتایج تکثیر با دیدن رسوب با استفاده از چشم غیر مسلح، استفاده از رنگ فلوئورسانس و ژل الکتروفورز بررسی شد. اختصاصیت روش lamp برای فاسیولا با استفاده از dna انگل های دیکروسلیوم دندریتیکم، تریکواسترونژیلوس کالابریفورمیس و اکینوکوکوس گرانولوزوس مورد سنجش قرار گرفت. جهت ارزیابی محدودیت تشخیص روش lamp برای تعیین جنس فاسیولا رقت سریالی از dna استخراج شده مورد استفاده قرار گرفت. یافته ها: واکنش مثبت lamp با استفاده از پرایمرهای اختصاصی دو گونه تعداد زیادی باند در سایزهای متفاوت در دمای 0c60 طی مدت 90 دقیقه تولید نمود. شرایط مطلوبی بدون هیچ واکنشی با سایر dna انگل ها ایجاد گردید. محدودیت تشخیص روش lamp تا pg 1 تعیین گردید. نتایج تشخیص رسوب و رنگ فلوئورسانس با الکتروفورز با ژل آگارز همخوانی داشتند. استنتاج: نتایج ما نشان دادند که روش lamp یک روش سریع، آسان، کم هزینه با اختصاصیت بالا و معتبر جهت افتراق گونه های فاسیولا در مطالعات اپیدمیولوژیکی و بالینی فاسیولوزیس انسانی و دامی در مناطق اندمیک می باشد.
منابع مشابه
تشخیص و افتراق سریع فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از روش loop-mediated Isothermal Amplification
Background and purpose: Fasciola hepatica and Fasciola gigantica are common liver flukes which affect both human and livestock worldwide. In this study we evaluated the loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for detection and discrimination of Fasciola species. Materials and methods: Fifty adults of Fasciola worms were isolated from sheep and cattle liver form abattoirs in Mazand...
متن کاملمقایسه آنتی‌ژن‌های خام فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا به‌وسیله آزمایش الیزا
Background: Fasciolosis is a worldwide disease with major economic and public health consequences. Early detection of the infection is important for the prevention and control of the disease. ELISA allows for early detection of fasciolosis in man and animals. Fasciolosis is caused by Fasciola hepatica and F. gigantica in man and domestic animals respectively. These two species have many similar...
متن کاملتشخیص بیماریها با استفاده از (Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP در دامپزشکی
مقدمه و هدف: نیاز به روشی ساده تر، با کارایی بالاتر، سریعتر و ارزانتر نسبت به روشهای موجود جهت تشخیص بیماریهای دامپزشکی روش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) ، روشی سریع و حساس می باشد که قادر است تعداد نسخه اندکی از DNA هدف را تا سطحی که توسط ژل الکترفورز قابل تشخیص باشد، تکثیر نماید.بعلت کارایی بالا و قدرت زیاد PCR ، این روش در سالهای اخیر بطور گسترده ای در تشخیص پاتوژن های مختلف بیماریزا اعم ا...
متن کاملمقایسه فاسیولاهپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا از لحاظ خصوصیات کاریوتیپی
در این مطالعه ابتدا 200 نمونه از انگلهای فاسیولاهپاتیکا و فاسیولاژیگانتیکا از کبد آلوده گوسفندان جدا گردید. پس از شستشو وتهیه سوسپانسیون سلولی،از سلولهای جنسی آنها با روش Air-dry گسترش کروموزومی تهیه شد ، پس از رنگ آمیزی با گمیسا،کروموزومهای دوگونه انگل از لحاظ کاریوتیپی مورد مطالعه و مقایسه قرار گرفت. طبق نتایج به دست آمده اسپرماتوسیتها به صورت روزت هشت تایی و اواوسیت ها به صورت انفرادی مشاهد...
متن کاملبررسی کارایی روشLAMP (Loop-mediated isothermal DNA amplification)
مقدمه:سالمونلاها از مهمترین باکتری های بیماری و عامل تیفوئید، باکتریمی، آنتروکولیت و سالمونلوز است که از عفونت های مشترک انسان و حیوانات می باشد. بیماریهای ناشی از این عامل یک معضل بزرگ بهداشتی در جهان به خصوص در کشورهای در حال توسعه از جمله کشور ما می باشد. بنابراین تشخیص سریع، دقیق و به موقع آن برای جلوگیری از اپیدمی و عوارض مخرب این باکتری ضروری به نظر می رسد. برای تشخیص سالمونلا روش های مخت...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانجلد ۲۶، شماره ۱۴۵، صفحات ۴۵-۵۳
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023